Coronavirus חדשני (SARS-COV-2) ערכת PCR בזמן אמת מרוצב
ערכת PCR רגישה מאוד ומוכנה לשימוש זמינה בפורמט Lyophilized (תהליך ייבוש הקפאה) לאחסון לטווח הארוך. ניתן להעביר את הערכה ולאחסן בטמפרטורת החדר והיא יציבה למשך שנה. כל צינור של Premix מכיל את כל הריאגנטים הדרושים להגברת ה- PCR, כולל טרנסקריפטאז הפוך, פולימראז TAQ, פריימרים, בדיקות ומצעי DNTPS. זה צריך רק להוסיף 13 מים מזוקקים ותבנית RNA שחולצה 5ul, ואז ניתן להפעיל אותם ולהגביר אותם על מכשירי ה- PCR.
מכונת QPCR צריכה לעמוד בדרישות הבאות:
1. התאמה 8 נפח צינור PCR רצועה 0.2 מ"ל
2. יש יותר מארבעה ערוצי איתור:
| עָרוּץ | עירור (NM) | פליטה (נ.מ.) | צבעים מכוילים מראש |
| 1. | 470 | 525 | FAM, SYBR GREEN I |
| 2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | 571 | 621 | רוקס, טקסס-אדום |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
PCR-Platfors:
מערכת PCR של 7500 זמן, BioRad CF96, ICYCLER IQ ™ מערכת גילוי PCR בזמן אמת, STRATAGENE MX3000P, MX3005P
הקושי בהובלת שרשרת קרה של מגיב לגילוי חומצות גרעין נגיף חדשני
כאשר מועברים ריאגנטים לגילוי חומצות גרעין קונבנציונאלי למרחקים ארוכים, נדרש אחסון ותחבורה של שרשרת קרה (-20 ± 5) כדי להבטיח את הביו-אקטיבי של האנזים בריגנטים יישאר פעיל. כדי לוודא שהטמפרטורה מגיעה לתקן, יש צורך בכמה קילוגרמים של קרח יבש עבור כל קופסה של מגיב לבדיקת חומצות גרעין אפילו פחות מ- 50 גרם, אך היא יכולה להימשך רק יומיים -שלושה. בפרספקטיבה של הנוהג בתעשייה, המשקל האמיתי של ריאגנטים שהונפקו על ידי היצרנים הוא פחות מ -10% (או הרבה פחות מערך זה) של המכולה. מרבית המשקל נובע מארון יבש, חבילות קרח וקופסאות קצף, כך שעלות ההובלה גבוהה במיוחד.
במארס 2020 החל קוביד -19 להתפרץ בהיקף גדול בחו"ל, והביקוש למגיב לגילוי חומצות גרעין גרעיניות חדשני נגיף עלה באופן דרמטי. למרות העלות הגבוהה של ייצוא המגיבים ברשת הקרה, מרבית היצרנים עדיין יכולים לקבל זאת בגלל הכמות הגדולה והרווח הגבוה.
עם זאת, עם שיפור מדיניות הייצוא הלאומית למוצרים אנטי-פנדמיים, כמו גם שדרוג השליטה הלאומית על זרימת האנשים והלוגיסטיקה, קיימת הרחבה וחוסר וודאות בזמן ההובלה של ריאגנטים, מה שהביא לבעיות מוצר בולטות שנגרמו על ידי התחבורה. זמן תחבורה מורחב (זמן ההובלה של כחצי חודש נפוץ מאוד) מוביל לכישלונות מוצרים תכופים כאשר המוצר מגיע ללקוח. זה הטריד את מרבית ריאגנטים לחומצות גרעין מייצאים מפעלים.
טכנולוגיה Lyophilized עבור מגיב PCR סייעה להובלת מגיב לגילוי חומצות גרעין גרעין חדשני ברחבי העולם ברחבי העולם ברחבי העולם
ניתן להעביר ולאחסן את ריאגנטים ה- PCR עם Lyophilized בטמפרטורת החדר, מה שלא יכול רק להפחית את עלות ההובלה, אלא גם להימנע מבעיות האיכות הנגרמות כתוצאה מתהליך ההובלה. לפיכך, Lyophilizing של המגיב הוא הדרך הטובה ביותר לפתור את בעיית הובלת הייצוא.
Lyophization כרוך בהקפאת תמיסה למצב מוצק, ואז סובלנות ומפריד בין אדי המים בתנאי ואקום. המומס המיובש נשאר במכולה עם אותה קומפוזיציה ופעילות. בהשוואה לריגנטים נוזליים קונבנציונליים, המגיב לגילוי חומצות גרעין גרעין חדשני עם רכיב מלא, המופק על ידי Liming Bio הוא בעל המאפיינים הבאים:
יציבות חום חזקה במיוחד:זה יכול לטיפול בעמידה ב 56 ℃ למשך 60 יום, והמורפולוגיה והביצועים של המגיב נותרו ללא שינוי.
אחסון ותחבורה רגילים בטמפרטורה:אין צורך ברשת קרה, אין צורך לאחסן בטמפרטורה נמוכה לפני שאינטאום, לשחרר באופן מלא את שטח האחסון הקור.
מוכן לשימוש:lyophilizing של כל הרכיבים, אין צורך בתצורת המערכת, הימנעות מאובדן רכיבים עם צמיגות גבוהה כמו אנזים.
יעדים מרבבים בצינור אחד:יעד הגילוי מכסה גן חדשני של Coronavirus ORF1AB, גן n, גן S כדי להימנע מהנגיף גנובריאציה. על מנת להפחית שלילי כוזב, גן RNase P אנושי משמש כבקרה פנימית, כדי לעמוד בצורך הקליני בבקרת איכות מדגם.
